次に、各サルの皮膚の下に低用量のクロトーを単回投与し、タンパク質のレベルを出生時に動物に通常存在するレベルまで上昇させた。 4時間後、研究者らはサルに20回の試験に分けて食物を見つけるタスクを完了させ、その後チームはその後2週間にわたってサルを再検査した。 全体として、動物は注射を受ける前よりも正しい選択をすることが多くなりました。 研究チームは、2つのバージョンのタスクでサルをテストした。1つは選択できるコンパートメントの数が少ない簡単なバージョン、もう1つは選択できるコンパートメントの数が多いより難しいバージョンである。 デュバル氏によると、クロトーは簡単なタスクでは約 6 パーセント、難しいタスクでは約 20 パーセントパフォーマンスが向上しました。
「これはとても心強いことです」と、この新しい研究には関与していないモー氏は言う。
研究者らは、2週間にわたってサルにこの作業を数回行わせたところ、たとえクロトーが注射後数日以内に体内で分解されても、認知能力向上効果はその間ずっと持続することがわかった。 「一度の投与で2週間持続するという事実は素晴らしいように思えますが、繰り返しの投与が再び効果があるかどうかは現時点ではわかりません」とバック老化研究所の最高経営責任者（CEO）エリック・バーディン氏は言う。研究には関与していない。
実際、マウスを使った以前の研究では、低用量と高用量のklothoの両方が認知力を高め、学習と記憶に挑戦するいくつかの迷路課題でより良いパフォーマンスを発揮するのに役立ちました。 しかし、デュバル氏のチームが体重1キログラム当たり10、20、30マイクログラムの用量をサルに投与したところ、効果は10マイクログラムの用量で頭打ちになった。 これは研究者にとって、いつかクロトー注射を人間にテストすることを検討しているため、重要な旗を立てることになる。 投与量に関しては、「多ければ多いほど良いというわけではない」とヴェルディン氏は言う。
人々は成人期の約5倍のクロトーを持って生まれます。そしてサルの実験では、低用量のクロトーは乳児期のレベルと同等でした。 デュバル氏は、身体がこれまでに経験した範囲内でオーバーシュートすることなく投与することが、マウスよりも霊長類にとってより重要であるのではないかと推測している。 次のステップは、「人間にとっての治療上のスイートスポット」を見つけるために、ヒトの臨床試験でさらに低用量をテストすることになる、とデュバル氏は言う。 「脳の健康に必要なのは、過剰摂取ではなく補給なのかもしれません。」
しかし、klotho は大きな謎です。klotho が脳にどのように作用するのか正確には誰も知りません。 「それは完全なブラックボックスです」とヴァーディン氏は言う。 研究者たちは、このタンパク質が何らかの方法で脳を保護しているに違いないと考えていますが、どのようにして保護しているのでしょうか? 多くの有害物質を脳から遠ざける血管と組織の半透性の境界である血液脳関門を通過できないようです。
クロトーの認知効果が体内に存在するよりも長く持続することを考えると、クロトーが脳内のニューロン間の接続に影響を及ぼし、潜在的に「記憶をよりよく受け取り、保持するためにシナプスを再設計する」可能性があるのではないかとデュバル氏は推測している。 彼女の研究グループは現在、クロトーがどのようにして脳に侵入するのか、そしてそこに到達すると何をするのかを理解するために取り組んでいます。